藍色高流速瓊脂糖微球（Blue Bio-Sep 6FF）
產(chǎn)品說明書
藍色高流速瓊脂糖微球是將藍色染料F3 GA鍵合在6FF瓊脂糖微球上形成的一種可利用基團親和作用來實現(xiàn)目標產(chǎn)品純化分離的親和色譜介質(zhì)。用于生物大分子如白蛋白、核苷酸輔助的酶、干擾素和凝血因子等的純化分離。
1.外觀：本品為藍色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。
2.理化指標
項 目
指 標
配 基 F3GA藍色染料
基 質(zhì) 6% 交聯(lián)高流速瓊脂糖
形狀 球形
粒徑 50~160 μm
蛋白質(zhì)吸附容量（HSA）18mg/ml
最高流速(25℃) 700 cm/h*
耐 壓 0.3 MPa
耐 熱 pH7水中120℃20min
工作溫度 4~40℃ pH適用范圍 3~13 (短時間)；4~12(長時間)
化學(xué)穩(wěn)定性 以下溶液中穩(wěn)定；
1mol/L NaOH;70%EtOH;；
8mol/L尿素;3 mol/L(NH4)2SO4
*柱子：內(nèi)徑16mm、柱長30cm。柱床高5cm,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl。
3． 包裝
產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝，外貼標簽，注明“品名、體積、顆粒大小、保質(zhì)期、批號、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)單位及地址” 等內(nèi)容。所選用的包裝應(yīng)有利于保證產(chǎn)品質(zhì)量、方便運輸和貯存。
4. 運輸
運輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。
5. 貯存
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~8℃（保存溶液為20% 乙醇+0.1mol/L KH2PO4,pH8.0），通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。 用過的柱子貯存在4℃（20% 乙醇+0.1mol/L KH2PO4,pH8.0）。
6.保質(zhì)期：暫定5年。
7.應(yīng)用
藍色高流速瓊脂糖微球是一種親和色譜介質(zhì)，利用樣品中組分與配基親和性的不同進行分離。用于用于生物大分子如白蛋白、干擾素和凝血因子等的純化分離。
下面簡要介紹介質(zhì)的使用過程。
7.1 裝柱
⑴讓所有的材料和試劑達到室溫。配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。 如樣品為白蛋白，使用的緩沖液如下： 初始緩沖液（平衡液）：0.05mol/ L K2HPO4,pH5~7(pH不同，吸附量不同)； 洗脫緩沖液：0.05mol/LKH2PO4+1.5mol/ L KCl,pH7.0。
⑵根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿。勻漿作脫氣處理。
⑶將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡。
⑷ 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
⑸ 打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
7.2平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。
7.3上樣
⑴樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。
⑵一般情況是讓目標產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)。
7.4洗脫
再選擇一種洗脫液洗下目標產(chǎn)品。
7.5再生
一般用高鹽濃度的洗脫緩沖液洗，洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。 若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
7.6 在位清洗
⑴對沉淀蛋白，可用4倍柱體積0.1mol/L NaOH 低流速洗脫，接著用4倍柱體積2 mol/L KSCN洗滌，馬上用5倍柱體積pH8.0的初始緩沖溶液洗滌。
⑶ 對強結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。再馬上用5倍柱體積pH8.0的緩沖溶液洗滌。
7.7注意
在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進入。
7.8滅菌
置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下20分鐘。
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